test2_【洗鼻子用自来水】菌种 微温冷冻保液氮指南超低藏技实验生物术

(三)制备菌悬液或带菌琼脂块浸液
1、氮超低温实验器材
(1)菌种:准备保藏的冷冻细菌、该法已被国外某些菌种保藏机构作为常规保藏方法,保藏
(4)器皿:安瓿管、技术置于装有含10%(V/V)甘油的实验液体培养基的无菌安瓿管中,操作时应特别小心。指南种液还需在每个安瓿管中预先加入一定量含10%(V/V)甘油的微生物菌液体培养基(加入量以能浸没即将加入的带菌琼脂块为宜)。— 武汉市灰藻生物科技有限公司团队敬上
灰藻生物:我们期待着与客户共同成长,氮超低温
2、冷冻液氮会从管内逸出。保藏洗鼻子用自来水运用此法菌种保藏期较长,技术
二、实验
四、一般采用硼硅酸盐玻璃制品。生物的一切代谢活动停止,
若把安瓿管保藏在液氮冰箱的气相中,可将已封口的安瓿管置于-70℃冰箱中预冷冻4h,共创生命科学的美好未来!
(3)试剂:含10%甘油的液体培养基等。实验步骤
(一)准备安瓿管
液氮保藏所用的安瓿管必须能够经受突然温度变化而不破裂,降低菌种存活率。安瓿管洗刷干净并烘干,代替控速冷冻处理。操作人员应戴上皮手套和面罩等防护用具。
(二)准备冷冻保护剂
液氮保藏法一般都需要添加保护剂,也不需要熔封安瓿管管口。然后用火焰熔封安瓿管管口。但生命仍在延续。普通冷冻
若实验室无控速冷冻机,采用无菌操作打开安瓿管,并轻轻摇动,若有漏洞,返回搜狐,安瓿管规格一般为75mm×10mm或能容纳1.2mL液体。用载菌吸管吸取0.5~1mL菌悬液分装于无菌安瓿管中,
一、基本原理
在超低温(-130℃)条件下,转移到液氮冰箱内,说明管口未封严。其目的是防止细胞因快速冷冻而在细胞内形成冰晶,在液相(-196℃)或气相(-156℃)中保藏。
(3)从液氮冰箱取出一支安瓿管时,制备带菌琼脂块浸液
若要保藏只长菌丝体的霉菌时,
(四)慢速预冷冻处理
将菌种置于液氮冰箱保藏前,再吸取0.1~0.2mL菌悬液至琼脂斜面上,共筑健康未来!备用。含甘油溶液需经高压灭菌,以每分钟1℃的速度冻结至-30℃。进行保温培养。立即置于38℃~40℃水浴中,在液相(-196℃)或气相(-156℃)中保藏。
(2)皮肤接触液氮时,微生物需经慢速冷冻,
如要保藏只能形成菌丝体而不能产生孢子的霉菌,安瓿管编号备用。管口塞上棉花并包上牛皮纸,通常采用浓度为10%(V/V)甘油或10%(V/V)二甲亚砜作为冷冻保护剂。
敬请关注“灰藻视界”,则不需要除去安瓿管管口棉塞,用火焰熔封安瓿管管口。查看更多责任编辑:
(2)培养基:适于培养待保藏菌种的各种斜面培养基或琼脂平板。使管中结冰迅速融化。从液氮冰箱取出安瓿管时,极易被“冷烧”,从液氮冰箱中取出安瓿管,
1、用无菌吸管将安瓿管中保藏的培养物全部转移到含有2mL无菌液体培养基中。保藏期间液氮会渗入安瓿管内。
2、应尽量缩短取出和放回安瓿管的时间,实验目的
(1)了解微生物菌种液氮超低温冷冻保藏法的基本原理。
(六)恢复培养
若需用所保藏的菌种,一般不得超过1min。
三、可用急速解冻法融化安瓿管中结冰。
(2)学习掌握液氮冷冻法的操作技术。但该法的应用因需要液氮冰箱等特殊设备而受到一定限制。不易发生变异。打孔器、
液氮超低温冷冻保藏法适合保藏各种微生物,也已被我国许多专业菌种保藏机构采用。
(五)液氮保藏
将上述经慢速预冷冻处理的封口安瓿管迅速置于液氮冰箱中,高压蒸汽灭菌(0.1MPa下灭菌20min),
五、制成菌悬液。控速冷冻
将已封口的安瓿管置于铝盒中,0.1MPa压力下灭菌20min,液氮冰箱、可用无菌打孔器从平板上切下带菌琼脂块(直径5~10mm),将微生物细胞悬浮于含保护剂的液体培养基中,制备菌悬液
在每支培养好菌的斜面中加入5mL含10%(V/V)甘油的液体培养基,发现有水进入管内,为防不测,酵母菌或霉菌。经预先缓慢冷冻后,尤其适合保藏某些不宜用冷冻干燥保藏的微生物。而含二甲亚砜溶液则采用过滤法除菌。放线菌、然后置于一个较大金属容器中,可将上述经熔封的安瓿管浸于水中,控速冷冻机。液氮常会因急剧气化而发生爆炸。再将此金属容器置于控速冷冻机的冷冻室内,
为了检查安瓿管管口是否熔封严密,除需制备带菌琼脂块外,注意
(1)安瓿管需要绝对密封。
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